時間:2023-03-13 11:04:56
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2、學(xué)雷鋒、樹新風(fēng),創(chuàng)和諧校園
3、弘揚雷鋒精神 創(chuàng)建文明縣城
4、左鄰右社,學(xué)習(xí)雷鋒,遇到困難你我來幫!
5、學(xué)雷鋒爭做時代新公民
6、弘揚民族傳統(tǒng) 爭當(dāng)時代先鋒
7、真情暖萬家,青春見行動
8、助人為樂學(xué)習(xí)雷鋒;
9、奉獻(xiàn) 友愛 互助 進(jìn)步
10、服務(wù)校園、奉獻(xiàn)社會,做公民道德的踐行者
11、學(xué)雷鋒助人為樂,做“雷鋒”人人尊敬;
12、真情暖萬家 青春見行動
13、讓行動與雷鋒精神同在
14、學(xué)雷鋒,見行動,為兩個‘文明’作
15、學(xué)雷鋒精神,樹立新社會新風(fēng)!
16、一份青春一份愛 愛心獻(xiàn)給全世界
17、雷鋒精神永遠(yuǎn)不會過時。
18、雷鋒精神萬人傳 幸福關(guān)愛滿人間
19、弘揚雷鋒精神 爭當(dāng)時代楷模
20、雷鋒精神永遠(yuǎn)連著你我他!
21、繼承優(yōu)良傳統(tǒng),弘揚雷鋒精神
22、傳承優(yōu)良傳統(tǒng) 弘揚雷鋒精神
23、好事雖小,意義卻大;
24、雷鋒精神就在身邊!
25、弘揚雷鋒精神,爭當(dāng)時代楷模
26、相約春天,讓雷鋒精神在校園閃光
27、學(xué)習(xí)雷鋒,你我參與!
28、宗申學(xué)雷鋒,服務(wù)樹新風(fēng)
29、愛心獻(xiàn)社會 真情暖人心
30、雷鋒精神是時代永不謝幕的話題
31、學(xué)雷鋒、憶傳統(tǒng)、獻(xiàn)愛心
32、和諧雷鋒,從我做起
33、弘揚雷鋒精神,青年志愿者與你同行
34、學(xué)雷鋒、樹新風(fēng)、迎奧運
35、文明新風(fēng)人人創(chuàng) 雷鋒精神代代傳
36、雷鋒精神人人學(xué)習(xí)!
37、人人憶雷鋒、人人想雷鋒、人人話雷鋒
38、弘揚雷鋒精神 爭做時代新人
39、人人為我,我為人人
40、學(xué)雷鋒、迎奧運、創(chuàng)和諧
41、做一顆閃閃發(fā)光的螺絲釘
42、學(xué)雷鋒、樹新風(fēng)、爭當(dāng)校園文明使者
43、爭做現(xiàn)代的雷鋒!
44、與時俱進(jìn)跟黨走 開拓創(chuàng)新獻(xiàn)青春
45、學(xué)習(xí)雷鋒精神 樹立社會新風(fēng)
46、眾人拾柴火焰高,公益事業(yè)靠大家
2、讓雷鋒精神扎根贛鄱大地,引領(lǐng)社會風(fēng)尚
3、雷鋒精神就在我們身邊!
4、弘揚雷鋒精神,做良好社會風(fēng)尚的創(chuàng)造者和傳播者
5、好事雖小,意義卻大;
6、爭做現(xiàn)代的雷鋒!
7、學(xué)習(xí)雷鋒的創(chuàng)新精神,銳意進(jìn)取、自強不息
8、學(xué)習(xí)雷鋒的奉獻(xiàn)精神,服務(wù)人民、助人為樂
9、服務(wù)校園、奉獻(xiàn)社會,做公民道德的踐行者
10、人人為我,我為人人
11、學(xué)雷鋒助人為樂,做“雷鋒”人人尊敬;
12、學(xué)習(xí)雷鋒,你我參與!
13、學(xué)雷鋒、樹新風(fēng)、爭當(dāng)校園文明使者
14、學(xué)習(xí)雷鋒的創(chuàng)業(yè)精神,艱苦奮斗、勤儉節(jié)約
15、雷鋒精神人人學(xué)習(xí)!
16、真情暖萬家,青春見行動
17、做一顆閃閃發(fā)光的螺絲釘
18、全心全意、雷厲鋒行
19、讓行動與雷鋒精神同在
20、雷鋒精神永遠(yuǎn)不會過時。
21、和諧雷鋒,從我做起
22、宗申學(xué)雷鋒,服務(wù)樹新風(fēng)
23、弘揚雷鋒精神,爭當(dāng)時代楷模
24、學(xué)雷鋒,見行動,為兩個‘文明’作貢獻(xiàn)
25、學(xué)習(xí)雷鋒,幫助需要幫助的人,做時代的新風(fēng)!
26、人人憶雷鋒、人人想雷鋒、人人話雷鋒
27、相約春天,讓雷鋒精神在校園閃光
28、左鄰右社,學(xué)習(xí)雷鋒,遇到困難你我來幫!
29、弘揚雷鋒精神,青年志愿者與你同行
30、雷鋒精神是時代永不謝幕的話題
31、學(xué)雷鋒、憶傳統(tǒng)、獻(xiàn)愛心
32、繼承優(yōu)良傳統(tǒng),弘揚雷鋒精神
33、學(xué)雷鋒爭做時代新公民
34、眾人拾柴火焰高,公益事業(yè)靠大家
35、送人玫瑰,手有余香,助人為樂,快樂一生
36、弘揚雷鋒精神,推動社會主義核心價值體系建設(shè)
37、參與志愿服務(wù),促進(jìn)社會和諧
38、學(xué)雷鋒發(fā)揚互幫互助;
39、學(xué)雷鋒、樹新風(fēng),創(chuàng)和諧校園
40、弘揚雷鋒精神,優(yōu)化發(fā)展環(huán)境,共建文明家園
41、孝順父母 關(guān)心他人 勤儉節(jié)約 熱愛勞動
42、學(xué)習(xí)雷鋒的敬業(yè)精神,干一行愛一行、專一行精一行
43、團(tuán)結(jié)友愛 助人為樂 尊重他人 善于合作
44、學(xué)習(xí)雷鋒,從自己做起,從小事做起
2、學(xué)習(xí)雷鋒好榜樣,三月花開助人樂。
3、學(xué)雷鋒助人為樂,做“雷鋒”人人尊敬;
4、助人為樂學(xué)習(xí)雷鋒;
5、學(xué)習(xí)雷鋒,你我參與!
6、雷鋒精神人人學(xué)習(xí)!
7、學(xué)雷鋒精神,樹立新社會新風(fēng)!
8、雷鋒精神永遠(yuǎn)連著你我他!
9、學(xué)習(xí)雷鋒,幫助需要幫助的人,做時代的新風(fēng)!
10、左鄰右社,學(xué)習(xí)雷鋒,遇到困難你我來幫!
11、雷鋒精神傳天下,互助暖流漾人心。
12、雷鋒精神是時代永不謝幕的話題!
13、弘揚雷鋒精神,做文明中學(xué)生
14、學(xué)雷鋒精神,樹校園新風(fēng)
15、從小事做起,與文明握手學(xué)習(xí)雷鋒,愛我校園,爭做文明中學(xué)生
16、塑造公民道德,爭做文明青少年雷鋒精神永放光芒
17、助人為樂情長在,雷鋒精神心永存向雷鋒同志學(xué)習(xí),做一名合格團(tuán)員
18、學(xué)雷鋒精神,做四有新人見到老師問聲好,見到同學(xué)點頭笑
19、爭做雷鋒式的好少年弘揚雷鋒精神 創(chuàng)建文明城校園將雷鋒精神進(jìn)行到底
20、愛心播種希望,奉獻(xiàn)點亮青春
21、“互助、友愛、進(jìn)步”“向雷鋒學(xué)習(xí),樹校園新風(fēng)”
22、“學(xué)習(xí)雷鋒同志,弘揚雷鋒精神”
23、“弘揚雷鋒精神,參與志愿服務(wù)”
24、“弘揚雷鋒精神,爭做時代新人”
25、學(xué)雷鋒精神,展青年風(fēng)采
26、學(xué)雷鋒、樹新風(fēng),創(chuàng)和諧校園
27、學(xué)雷鋒、樹新風(fēng)、迎奧運
28、全心全意、雷厲鋒行
29、學(xué)雷鋒、迎奧運、創(chuàng)和諧
30、和諧雷鋒,從我做起
31、學(xué)雷鋒爭做時代新公民
32、學(xué)雷鋒發(fā)揚互幫互助;
33、學(xué)雷鋒助人為樂,做“雷鋒”人人尊敬;
34、助人為樂學(xué)習(xí)雷鋒;
35、學(xué)習(xí)雷鋒,你我參與!
36、雷鋒精神人人學(xué)習(xí)!
37、學(xué)雷鋒精神,樹立新社會新風(fēng)!
38、雷鋒精神永遠(yuǎn)連著你我他!
39、學(xué)習(xí)雷鋒,幫助需要幫助的人,做時代的新風(fēng)!
40、左鄰右社,學(xué)習(xí)雷鋒,遇到困難你我來幫!
41、好事雖小,意義卻大;
42、雷鋒精神是時代永不謝幕的話題
43、爭做現(xiàn)代的雷鋒!
44、雷鋒精神就在我們身邊!
45、學(xué)雷鋒,見行動,為兩個‘文明’作貢獻(xiàn)
46、繼承優(yōu)良傳統(tǒng),弘揚雷鋒精神
47、服務(wù)校園、奉獻(xiàn)社會,做公民道德的踐行者
48、宗申學(xué)雷鋒,服務(wù)樹新風(fēng)
49、人人為我,我為人人
50、相約春天,讓雷鋒精神在校園閃光
51、讓行動與雷鋒精神同在
52、做一顆閃閃發(fā)光的螺絲釘
53、學(xué)雷鋒、憶傳統(tǒng)、獻(xiàn)愛心
54、弘揚雷鋒精神,爭當(dāng)時代楷模
55、人人憶雷鋒、人人想雷鋒、人人話雷鋒
56、學(xué)雷鋒、樹新風(fēng)、爭當(dāng)校園文明使者
57、真情暖萬家,青春見行動
58、眾人拾柴火焰高,公益事業(yè)靠大家
59、服務(wù)校園、奉獻(xiàn)社會,做公民道德的踐行者
60、學(xué)雷鋒、樹新風(fēng)、爭當(dāng)校園文明使者
61、弘揚雷鋒精神,推動社會主義核心價值體系建設(shè)。
62、春天來了,雷鋒發(fā)芽了。
63、天公重抖擻。不拘一格降雷鋒。
64、廣泛普及愛國、敬業(yè)、誠信、友善基本道德規(guī)范。
65、窗口學(xué)雷鋒 服務(wù)暖人心。
66、釘子是小,釘子精神卻不小。
67、實踐“三個代表”、弘揚雷鋒精神。
68、弘揚雷鋒精神,共建富裕和諧秀美江西。
69、弘揚雷鋒精神,爭做時代新人。
70、讓雷鋒精神扎根贛鄱大地,引領(lǐng)社會風(fēng)尚。
71、雷鋒活著,我們是時代一個個活雷鋒。
72、向雷鋒同志學(xué)習(xí),樹客運行業(yè)新風(fēng)。
73、崗位學(xué)雷鋒 爭做好員工。
74、學(xué)習(xí)雷鋒的奉獻(xiàn)精神,服務(wù)人民、助人為樂。
75、學(xué)習(xí)雷鋒,從自己做起,從小事做起。
76、團(tuán)結(jié)友愛 助人為樂 尊重他人 善于合作。
77、學(xué)習(xí)雷鋒,為了大家,也為了你。
78、學(xué)雷鋒精神,樹立新社會新風(fēng)!
79、雷鋒精神永遠(yuǎn)連著你我他!
80、學(xué)習(xí)雷鋒,幫助需要幫助的人,做時代的新風(fēng)!
81、左鄰右社,學(xué)習(xí)雷鋒,遇到困難你我來幫!
82、雷鋒精神傳天下,互助暖流漾人心。
83、雷鋒精神是時代永不謝幕的話題!
3.學(xué)習(xí)雷鋒,從我做起,從身邊做起。
4.學(xué)習(xí)雷鋒,一切從做起,從心做起,從小事做起。
5.釘子是小,釘子精神卻不小。
6.學(xué)習(xí)雷鋒,大家,也你。
7.雷鋒不朽,雷鋒精神永垂不朽。
8.雷鋒,就是幫助。
9.天公重抖擻。不拘一格降雷鋒。
10、雷鋒活著,是時代個活雷鋒。
11、講文明從我做起樹新風(fēng)從現(xiàn)在開始
12、雷鋒的精神就像香樟樹,一棵,當(dāng)然不起眼,是幾百棵甚至是幾千棵,就成了綠蔭。
13、三月春風(fēng)處處留,雷鋒精神心中留。
14、多雷鋒,多一份關(guān)愛。
15、春天來了,雷鋒精神發(fā)芽了。
16、用一點一滴小愛,匯成一片愛的海洋。
17、學(xué)習(xí)雷鋒好榜樣,仁愛待人美名揚。
18、雷鋒精神傳天下,互助暖流漾人心。
19、窗口學(xué)雷鋒 服務(wù)暖人心
20、送人玫瑰,手有余香,助人為樂,快樂一生
21、雷鋒能做的我們都能做!
22、弘揚雷鋒精神 創(chuàng)建文明城鎮(zhèn)
23、學(xué)習(xí)雷鋒好榜樣,三月花開助人樂。
24、學(xué)習(xí)雷鋒的奉獻(xiàn)精神,服務(wù)人民、助人為樂
25、學(xué)習(xí)雷鋒的敬業(yè)精神,干一行愛一行、專一行精一行
26、學(xué)習(xí)雷鋒的創(chuàng)新精神,銳意進(jìn)取、自強不息
27、學(xué)習(xí)雷鋒的創(chuàng)業(yè)精神,艱苦奮斗、勤儉節(jié)約
28、弘揚雷鋒精神,推動社會主義核心價值體系建設(shè)
29、學(xué)雷鋒,樹新風(fēng),揚正氣,比奉獻(xiàn)
30、弘揚雷鋒精神,優(yōu)化發(fā)展環(huán)境,共建文明家園
31、弘揚雷鋒精神,做良好社會風(fēng)尚的創(chuàng)造者和傳播者
32、人人為我,我為人人
33、讓雷鋒精神扎根贛鄱大地,引領(lǐng)社會風(fēng)尚
34、參與志愿服務(wù),促進(jìn)社會和-諧
35、學(xué)習(xí)雷鋒同志,弘揚雷鋒精神
36、當(dāng)文明城市志愿者做新時代的活雷鋒
37、愛心奉獻(xiàn)社會真情溫暖人心
38、服務(wù)社會奉獻(xiàn)他人提升自我共創(chuàng)和諧
39、弘揚雷鋒精神建設(shè)幸福郴州
40、學(xué)雷鋒樹新風(fēng)促和諧
41、市民素質(zhì)高一分城市形象美十分
42、弘揚雷鋒精神,共建富裕和-諧秀美江西
43、學(xué)習(xí)雷鋒同志弘揚雷鋒精神
44、同愛一方熱建文明家園
45、從我做起爭做講文明有素養(yǎng)的人
46、創(chuàng)建文明城市構(gòu)建和諧社會
47、講究社會公德愛護(hù)公共設(shè)施
2、弘揚雷鋒精神,搞好優(yōu)質(zhì)服務(wù)。
3、春天來了,雷鋒發(fā)芽了。
4、眾人拾柴火焰高,公益事業(yè)靠大家
5、沒有雷鋒,就沒有關(guān)心和幫助。
6、繼承優(yōu)良傳統(tǒng),弘揚雷鋒精神
7、釘子是小,釘子精神卻不小。
8、學(xué)習(xí)雷鋒的敬業(yè)精神,干一行愛一行、專一行精一行。
9、廣泛普及愛國、敬業(yè)、誠信、友善基本道德規(guī)范。
10、窗口學(xué)雷鋒服務(wù)暖人心。
11、學(xué)習(xí)雷鋒,從自己做起,從小事做起。
12、學(xué)習(xí)雷鋒的創(chuàng)業(yè)精神,艱苦奮斗、勤儉節(jié)約。
13、參與志愿服務(wù),促進(jìn)社會和諧。
14、學(xué)習(xí)雷鋒好榜樣,三月花開助人樂。
15、學(xué)習(xí)雷鋒的“釘子”精神,一面擠,一頭鉆。
16、學(xué)習(xí)雷鋒的創(chuàng)新精神,銳意進(jìn)取、自強不息。
17、實踐“三個代表”、弘揚雷鋒精神。
18、讓雷鋒精神扎根贛鄱大地,引領(lǐng)社會風(fēng)尚。
19、雷鋒不朽,雷鋒精神永垂不朽。
20、增人玫瑰,手有余香。
21、見到雜物彎彎腰,節(jié)制零食不亂拋。
22、雷鋒活著,我們是時代一個個活雷鋒。
23、學(xué)習(xí)雷鋒,從我做起,從身邊做起。
24、弘揚雷鋒精神,做良好社會風(fēng)尚的創(chuàng)造者和傳播者。
25、學(xué)習(xí)雷鋒的奉獻(xiàn)精神,服務(wù)人民、助人為樂。
26、弘揚雷鋒精神,創(chuàng)建文明城鎮(zhèn)。
27、雷鋒精神傳天下,互助暖流漾人心。
28、學(xué)習(xí)雷鋒,為了大家,也為了你。
29、團(tuán)結(jié)友愛助人為樂尊重他人善于合作。
30、學(xué)雷鋒,樹新風(fēng),揚正氣,比奉獻(xiàn)。
31、人人為我,我為人人。
32、弘揚雷鋒精神,共建富裕和諧秀美江西。
33、天公重抖擻。不拘一格降雷鋒。
34、弘揚雷鋒精神,推動社會主義核心價值體系建設(shè)。
35、雷鋒能做的我們都能做!
36、孝順父母關(guān)心他人勤儉節(jié)約熱愛勞動。
37、學(xué)雷鋒、憶傳統(tǒng)、獻(xiàn)愛心
38、弘揚雷鋒精神,爭做時代新人。
39、春天來了,雷鋒精神發(fā)芽了。
40、弘揚雷鋒精神,參與志愿服務(wù)。
41、向雷鋒同志學(xué)習(xí),樹客運行業(yè)新風(fēng)。
42、弘揚雷鋒精神,優(yōu)化發(fā)展環(huán)境,共建文明家園。
43、送人玫瑰,手有余香,助人為樂,快樂一生。
3、 服務(wù)校園、奉獻(xiàn)社會,做公民道德的踐行者
4、 弘揚雷鋒精神,做良好社會風(fēng)尚的創(chuàng)造者和傳播者
5、 人人為我,我為人人
6、 讓雷鋒精神扎根贛鄱大地,引領(lǐng)社會風(fēng)尚
7、 參與志愿服務(wù),促進(jìn)社會和諧
8、 送人玫瑰,手有余香,助人為樂,快樂一生
9、 讓行動與雷鋒精神同在
10、 弘揚雷鋒精神,推動社會主義核心價值體系建設(shè)
11、 廣泛普及愛國、敬業(yè)、誠信、友善基本道德規(guī)范
12、 弘揚雷鋒精神,優(yōu)化發(fā)展環(huán)境,共建文明家園
13、 學(xué)雷鋒精神,樹立新社會新風(fēng)!
14、 雷鋒精神永遠(yuǎn)連著你我他!
15、 學(xué)習(xí)雷鋒,幫助需要幫助的人,做時代的新風(fēng)!
16、 左鄰右社,學(xué)習(xí)雷鋒,遇到困難你我來幫!
17、 好事雖小,意義卻大;
18、 雷鋒精神是時代永不謝幕的話題
19、 團(tuán)結(jié)友愛 助人為樂 尊重他人 善于合作
20、 繼承優(yōu)良傳統(tǒng),弘揚雷鋒精神
21、 孝順父母 關(guān)心他人 勤儉節(jié)約 熱愛勞動
22、 雷鋒精神永遠(yuǎn)不會過時、
23、 爭做現(xiàn)代的雷鋒!
24、 全心全意、雷厲鋒行
25、 學(xué)雷鋒、迎奧運、創(chuàng)和諧
26、 和諧雷鋒,從我做起
27、 學(xué)雷鋒爭做時代新公民
28、 學(xué)雷鋒發(fā)揚互幫互助;
29、 相約春天,讓雷鋒精神在校園閃光
30、 助人為樂學(xué)習(xí)雷鋒;
31、 學(xué)習(xí)雷鋒,你我參與!
32、 雷鋒精神人人學(xué)習(xí)!
33、 學(xué)雷鋒精神,樹立新社會新風(fēng)!
34、 人人憶雷鋒人人想雷鋒人人話雷鋒
35、 學(xué)雷鋒樹新風(fēng)爭當(dāng)校園文明使者
36、 真情暖萬家,青春見行動
37、 學(xué)雷鋒、樹新風(fēng)、爭當(dāng)校園文明使者
38、 服務(wù)校園奉獻(xiàn)社會,做公民道德的踐行者
39、 學(xué)雷鋒樹新風(fēng)爭當(dāng)校園文明使者
40、 弘揚雷鋒精神,青年志愿者與你同行
41、 學(xué)雷鋒樹新風(fēng),創(chuàng)和諧校園
42、 學(xué)雷鋒、樹新風(fēng)、爭當(dāng)校園文明使者
43、 弘揚雷鋒精神,青年志愿者與你同行
44、 學(xué)雷鋒助人為樂,做“雷鋒”人人尊敬;
45、 真情暖萬家,青春見行動
46、 學(xué)習(xí)雷鋒,從自己做起,從小事做起
47、 學(xué)雷鋒憶傳統(tǒng)獻(xiàn)愛心
48、 做一顆閃閃發(fā)光的螺絲釘
49、 眾人拾柴火焰高,公益事業(yè)靠大家
50、 學(xué)雷鋒樹新風(fēng)迎奧運
51、 全心全意雷厲鋒行
52、 學(xué)雷鋒迎奧運創(chuàng)和諧
53、 學(xué)雷鋒、憶傳統(tǒng)、獻(xiàn)愛心
54、 學(xué)雷鋒爭做時代新公民
類風(fēng)濕關(guān)節(jié)炎(RA)是慢性全身性自身免疫性疾病,其病理基礎(chǔ)為關(guān)節(jié)滑膜的過度增生,誘導(dǎo)異常增生的滑膜組織發(fā)生凋亡可能成為治療RA的有效途徑?;さ脑錾c凋亡之間的平衡受多種因素的制約,細(xì)胞因子是其因素之一。在眾多細(xì)胞因子中,腫瘤壞死因子(TNF)-α和白細(xì)胞介素(IL)-1β扮演著重要的角色。研究表明,TNF-α抑制細(xì)胞發(fā)生凋亡的機制受核轉(zhuǎn)錄因子-κβ(Nuclear factor-κβ,NF-κβ)的調(diào)控[1], Yamasaki等[2]研究認(rèn)為NF-κβ可能是治療RA的目標(biāo)分子。本實驗通過對牛Ⅱ型膠原(BcⅡ)誘導(dǎo)關(guān)節(jié)炎(CIA)大鼠不同組合穴位貼敷類風(fēng)關(guān)巴布劑,觀察其對大鼠滑膜細(xì)胞NF-κβ表達(dá)的影響,并初步探討經(jīng)絡(luò)腧穴在其中的作用。
1 實驗材料
1.1 動物
Wistar大鼠,清潔級健康雄性,80只,體重(120±15)g,購
于上海斯萊克實驗動物有限責(zé)任公司,正常飼養(yǎng)。
1.2 藥物與試劑
雷公藤、白花蛇舌草、乳香、沒藥;BcⅡ,Chondrex公司(美國);完全弗氏佐劑,Sigma公司(美國);IL-1βELISA kit購于Biosource公司(美國);TNF-α ELISA kit購于Biosource公司(美國);NF-κβ購于santa cruz Biotechnology,inc(美國);多聚賴氨酸玻片100張,EiVision+PolymerHRP(Ms/Rb) IHC Kit 6 mL。
1.3 儀器
顯微鏡OLYMPUS(日本),低溫高速離心機BECKMEN(美國),酶標(biāo)儀Bio-rad680(美國)。
2 實驗方法
2.1 類風(fēng)關(guān)巴布劑的組成及制作方法
雷公藤、白花蛇舌草、乳香、沒藥等,共12味,按固定劑量配伍(其中雷公藤占總藥量的28%),曬干,研粉,過20目篩,用80%乙醇滲漉提取,然后過濾取液,經(jīng)低溫低壓(50 ℃,-0.8個大氣壓)蒸餾去乙醇后得浸膏。將浸膏按一定比例加入事先配制的巴布劑基質(zhì)(主要成分明膠、甘油、聚丙烯酸鈉等)中,并加入0.5%的促滲劑(氮酮)、一定比例的乳化劑及防腐劑等,充分溶合,均勻涂布于無紡布上,覆蓋聚乙烯薄膜,切成3 cm×3 cm的方塊(重量1 g),密封包裝,陰涼處儲存?zhèn)溆谩?/p>
2.2 造模和分組
隨機從100只大鼠中選出10只為正常對照,其余90只用于造模,參照文獻(xiàn)[3]方法配制成Ⅱ型膠原乳劑。具體方法為:在無菌條件下,用0.1 mol/L冰醋酸充分溶解BcⅡ,濃度為4 mg/mL,置4 ℃冰箱過夜后,與弗氏完全佐劑等體積混合、振蕩乳化,制成BcⅡ乳劑(即每0.5 mL含1 mg BcⅡ)。置4 ℃冰箱保存?zhèn)溆谩W⑸浞椒ǎ河诖笫蟊巢考拔哺?點行皮內(nèi)注射,每點0.1 mL,總量0.5 mL(含1 mg BcⅡ型膠原)。15 d后同法分2點皮內(nèi)激發(fā)注射。正常對照組予以生理鹽水同法注射。初次免疫25 d后參照關(guān)節(jié)炎指數(shù)評分標(biāo)準(zhǔn)[1]對造模效果進(jìn)行評估,評分達(dá)6分以上的大鼠被用于繼續(xù)實驗。將造模成功的大鼠隨機分為4組,即類風(fēng)關(guān)巴布劑局部穴位貼敷組(局部組)、類風(fēng)關(guān)巴布劑遠(yuǎn)道穴位貼敷組(遠(yuǎn)道組)、類風(fēng)關(guān)巴布劑系統(tǒng)穴位貼敷組(系統(tǒng)組)和模型對照組(模型組)各10只。
2.3 給藥
根據(jù)臨床及有關(guān)動物實驗的取穴方案[4]取穴。系統(tǒng)組:大椎、雙側(cè)腎俞、雙側(cè)太溪,共5個穴點;遠(yuǎn)道組:大椎、雙側(cè)腎俞,共3個穴點;局部組:雙側(cè)太溪,共2個穴點。根據(jù)貼敷總面積相同(劑量相等)的原則,系統(tǒng)組每穴貼敷面積為0.15 cm2的圓形巴布劑(半徑0.22 cm);遠(yuǎn)道組每穴貼敷面積為0.25 cm2(半徑0.28 cm);局部組每穴貼敷面積為0.375 cm2 (半徑0.35 cm)。在穴位處脫毛后貼敷,每3 d貼敷1次,共5次,每次雷公藤甲素劑量約為3.8 μg[5]。正常組和模型組模仿局部組貼敷不含藥物的巴布劑基質(zhì)。15 d后各組同時處死取標(biāo)本。
2.4 取材
大鼠稱重,用2%戊巴比妥納腹腔麻醉,仰位固定,沿著左側(cè)后腿膝關(guān)節(jié)正中縱行切開皮膚直至暴露出膝關(guān)節(jié)位中心約3 cm×3 cm的區(qū)域。沿髕骨上緣約0.3~0.4 cm處向下切割至股骨,再分別沿髕骨兩側(cè)向下分離至脛骨,此時即打開了膝關(guān)節(jié)腔,可見由髕骨下極向下延續(xù)有一層平滑光亮呈淺淡黃色的滑膜組織。用眼科直鑷輕輕夾住其中央,用眼科剪完整剪下,置10%的中性甲醛中固定,用于檢測NF-κβ的免疫組織化學(xué)染色。同法取右側(cè)滑膜,滑膜取出之后,用生理鹽水1 mL沖洗關(guān)節(jié)腔,收集關(guān)節(jié)腔液和關(guān)節(jié)滑膜組織,用于IL-1β、TNF-α的檢測。
2.5 檢測指標(biāo)
2.5.1 細(xì)胞因子的檢測
IL-1β、TNF-α活性測定采用ELISA法,按照所附說明書測定關(guān)節(jié)滑膜組織溶漿的活性。先加入標(biāo)準(zhǔn)品和待測樣品,設(shè)置陰性對照,加入生物素結(jié)合的一抗(IL-1β、TNF-α),37 ℃溫箱孵育2 h,然后用洗滌液充分洗滌4次,向濾紙印干。加入辣根過氧化物酶標(biāo)記的二抗工作液25 ℃孵育1 h,再用洗滌液充分洗滌4次,向濾紙印干。加入顯色液25 ℃孵育30 min后加入終止液。上機檢測吸光度值。
2.5.2 滑膜組織核轉(zhuǎn)錄因子-κβ的免疫組化ABC染色
準(zhǔn)備組織切片(石蠟切片脫蠟至水,冰凍切片和細(xì)胞培養(yǎng)片用適當(dāng)方法固定);抗原修復(fù)(微波加熱法,適用石蠟切片),將切片置于耐高溫容器中,注入抗原修復(fù)液,使切片位于液面以下。置微波爐內(nèi)加熱使容器內(nèi)液體溫度保持在92~98 ℃之間并持續(xù)5 min,取出容器,室溫冷卻,30~50 min后降至室溫。用TBS 沖洗切片4~5次,甩干,擦凈,加20 μL 3% H2O2-甲醇溶液(Reagent F),于室溫濕盒中封閉30 min。取出切片,用TBS沖洗4~5次,甩干,擦凈。用封閉液(Reagent B)20 μL覆蓋,室溫濕盒孵育30 min。用吸水紙將封閉液吸去,勿洗,滴加適當(dāng)比例稀釋的一抗。37 ℃孵育1~2 h或4 ℃過夜。TBS沖洗4~5次,甩干,擦凈。滴加生物素標(biāo)記二抗(Reagent C)20 μL,室溫濕盒孵育1~2 h。TBS沖洗4~5次,甩干,擦凈。滴加酶標(biāo)親和素(Reagent D)20 μL,室溫濕盒孵育30 min。TBS沖洗4~5次,滴加DAB工作液(Reagent E)約30 μL/片,著色后迅速(約1 min內(nèi))沖洗干凈。20 μL蘇木精(Reagent G)復(fù)染。沖洗干凈脫水封片,鏡檢。
2.5.3 核轉(zhuǎn)錄因子-κβ積分[6]
在滑膜組織中NF-κβ表達(dá)陽性的滑膜組織細(xì)胞核呈橘黃色或棕黃色,每張切片沿滑膜組織帶計算400倍視野中陽性細(xì)胞的占有率,計數(shù)3個視野,標(biāo)出每個視野平均陽性細(xì)胞占有率,并按陽性細(xì)胞占有率分為5級:“0”為無陽性細(xì)胞,“+”為陽性細(xì)胞0~25%,“++”為陽性細(xì)胞25%~50%,“+++”為陽性細(xì)胞50%~75%,“++++”為陽性細(xì)胞75%~100%。0級積分為0,“+”積分為1,以此類推。
2.6 統(tǒng)計學(xué)方法
用SPSS11.0統(tǒng)計軟件,若數(shù)據(jù)為正態(tài)分布總體比較采用多組單因素方差分析,組間比較用q檢驗(Newman- Keuls法),否則用秩和檢驗的Kruskal-Wallis法和Nemenyi法,P
3 結(jié)果
(見表1、表2)表1 各組大鼠滑膜細(xì)胞NF-κβ的表達(dá)(略)注:與模型組比較,P
轉(zhuǎn)貼于
4 討論
NF-κβ是1986年由Sen和Baltimore首先報道[7],并發(fā)現(xiàn)B細(xì)胞核提取物中有一種核蛋白能與免疫球蛋白K輕鏈基因增強子κβ序列特異結(jié)合,促進(jìn)了K輕鏈的表達(dá),被稱為NF-κβ。越來越多的證據(jù)表明,在RA發(fā)病的過程中,NF-κβ做為轉(zhuǎn)錄因子家族成員參與了滑膜組織的過度增生和炎癥過程[8]。NF-κβ在胞漿中與其抑制亞單位Ⅰ-κβ結(jié)合而處于未活化狀態(tài),并可被TNF-α、IL-1β等不同的信號所激活,其活化則有賴于胞漿中Ⅰ-κβ的降解。在正?;?,NF-κβ的表達(dá)量很低[9]。在RA的滑膜中,免疫活性NF-κβ蛋白p50和p65大量表達(dá)于襯里層細(xì)胞和血管內(nèi)皮細(xì)胞中[10]。NF-κβ的活化在RA早期滑膜炎癥和增生的過程中起中心罪犯作用[11]。
在正常細(xì)胞構(gòu)成性表達(dá)活化的NF-κβ僅見于成熟B細(xì)胞、漿細(xì)胞和某些神經(jīng)元中,而其他大多數(shù)細(xì)胞的NF-κβ需在外界的刺激誘導(dǎo)下發(fā)生激活。許多細(xì)胞外因素可誘導(dǎo)NF-κβ的活化,如炎性細(xì)胞因子TNF-α、IL-1β等,但最終都通過IKK使Ⅰ-κβ降解而與NF-κβ解離,暴露NF-κβ的NLS,使NF-κβ經(jīng)核孔進(jìn)入核內(nèi),與DNA靶序列結(jié)合,發(fā)揮轉(zhuǎn)錄調(diào)控效應(yīng);而NF-κβ的活化導(dǎo)致了許多基因的表達(dá),以直接或間接的方式調(diào)節(jié)機體的生理和病理反應(yīng)。在此過程中,TNF-α、IL-1β等前炎細(xì)胞因子在NF-κβ作用下生成增加,它們作為外界刺激因子進(jìn)一步活化NF-κβ信號通路,產(chǎn)生正反饋放大作用,這是NF-κβ迅速動員、反應(yīng)靈敏的重要條件。然而,由于NF-κβ活化導(dǎo)致大量細(xì)胞因子、酶等生物活性物質(zhì)的產(chǎn)生,它的過度活化必然導(dǎo)致機體的病理反應(yīng)和損傷,正常細(xì)胞內(nèi)NF-κβ的活化是在細(xì)胞內(nèi)外通路的正、負(fù)反饋的精細(xì)調(diào)節(jié)下,使NF-κβ的活化保持在適當(dāng)?shù)乃?。正、?fù)兩種反饋調(diào)節(jié)往往同時進(jìn)行,NF-κβ是否處于活化狀態(tài)則取決于何種調(diào)節(jié)占優(yōu)勢。
CIA的產(chǎn)生和發(fā)展與RA有著很多的相似性,二者都依賴于自身反應(yīng)性T細(xì)胞和B細(xì)胞的激活,并能產(chǎn)生類似類風(fēng)濕因子的抗體。Seetharaman等[12]在CIA大鼠的研究表明,對于Ⅰ型和Ⅱ型T細(xì)胞依賴的免疫應(yīng)答而言,抗體誘導(dǎo)NF-κβ的活化主要導(dǎo)致T細(xì)胞依賴的免疫應(yīng)答,抑制NF-κβ信號通路,使血清TNF-γ、IgG2a抗Ⅱ型膠原(CⅡ)抗體水平明顯下降而IgG1水平不變,CD8+T細(xì)胞減少,CIA發(fā)病率及嚴(yán)重性明顯減少和減輕。因此,本實驗選用CIA大鼠為模型。
RA屬于中醫(yī)學(xué)“痹證”范疇,近年來,大量研究認(rèn)為雷公藤對CIA大鼠有效,并有采用含雷公藤的復(fù)方中藥穴位貼敷治療CIA大鼠的研究[13]。我們將以雷公藤為主藥的復(fù)方中藥制劑與針灸穴位有機結(jié)合,研制類風(fēng)關(guān)巴布劑,并進(jìn)行了毒理、制劑學(xué)及臨床的研究,在大鼠佐劑性關(guān)節(jié)炎穴位貼敷研究中,證明相同的給藥劑量(貼敷面積)不同的穴位組合作用有差異,以系統(tǒng)組(遠(yuǎn)近配穴)最佳[14]。另據(jù)研究,雷公藤甲素可以下調(diào)CIA大鼠滑膜細(xì)胞TNF-α的表達(dá),同時還可以有效抑制NF-κβ的表達(dá)與活性[15]。本實驗中,造模后NF-κβ積分水平明顯升高,治療后各組都有所下降,以系統(tǒng)組最接近正常,同時治療后各組滑膜浸液的TNF-α、IL-1β水平也有明顯下降。因此,類風(fēng)關(guān)巴布劑穴位貼敷能夠有效打破NF-κβ與TNF-α、IL-1β之間的正反饋調(diào)節(jié)的惡性循環(huán)。
在本次實驗中,除了藥物的療效外,合理用穴也是關(guān)鍵要素,一方面,通過經(jīng)絡(luò)腧穴給藥對藥效的放大作用來提高療效,另外,遠(yuǎn)近配穴可能通過標(biāo)本兼治,多靶點起效,使其整體療效優(yōu)于單純遠(yuǎn)道取穴或局部取穴。
參考文獻(xiàn)
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活動主題:弘揚雷鋒精神
活動內(nèi)容:
1. 倡導(dǎo)文明出行,擺放校內(nèi)共享小黃車
2. 倡導(dǎo)垃圾分類,張貼有關(guān)垃圾分類的標(biāo)語
3. 倡導(dǎo)維護(hù)校園衛(wèi)生,清潔路邊座椅
活動總結(jié) :
“學(xué)雷鋒、樹新風(fēng)”是每年的3.5學(xué)雷鋒期間最為流行的“口頭禪”,未響應(yīng)校團(tuán)委的號召,外國語學(xué)院團(tuán)委在3.5期間展開了不同類型的學(xué)雷鋒活動。3月1日召集各支部支書及宣傳委員舉行了學(xué)雷鋒動員大會。會議上主要說明了3月5日活動當(dāng)天的具體安排并自制垃圾分類標(biāo)語。出席會議共21人,7人一組分為三隊:文明出行隊、清潔校園隊、 文明標(biāo)語隊。此外,自3月1日起至5日,外國語學(xué)院團(tuán)委運用微博宣傳平臺號召各支部微博平臺發(fā)送學(xué)雷鋒文章及短微博,共計90條。
學(xué)雷鋒 獻(xiàn)愛心 弘揚雷鋒精神,爭做文明好學(xué)生
二、組織領(lǐng)導(dǎo)
組 長:xxx
副組長:xxx
成 員:全體同學(xué)
三、活動內(nèi)容及方法步驟
第一階段:宣傳動員(3月1日~3月4日)
1、利用早操時間,舉行“學(xué)雷鋒精神,樹文明新風(fēng),創(chuàng)安全校園”全校動員儀式。
2、各班召開一次“弘揚雷鋒精神,爭做文明學(xué)生”的主題班會進(jìn)行動員。
3、學(xué)生科和團(tuán)委制作板報和懸掛標(biāo)語以及廣播進(jìn)行宣傳。標(biāo)語內(nèi)容:學(xué)雷鋒精神,樹文明新風(fēng),創(chuàng)和諧校園 第二階段:組織實施(3月5日~3月27日)
(一)“我心中的雷鋒”活動
1、開展“我心中的雷鋒”主題班會課,大家積極探討新時代怎樣學(xué)雷鋒,我們應(yīng)該怎樣學(xué)雷鋒等,由各班班主任組織。
2、各班以“學(xué)雷鋒 獻(xiàn)愛心”為主題制作黑板報,3月10日前完成。
3、以班為單位自行組織學(xué)生通過電視、報刊等途徑觀看雷鋒事跡,感動中國人物等。
(二) “建筑學(xué)子獻(xiàn)愛心”活動
1、“書本傳遞愛心,共享讀書快樂”捐書活動。每人捐出一本自己喜愛并想與他人分享的書籍。要求所捐書本內(nèi)容要求健康,外觀整潔干凈,不缺頁,無破損,教材除外。
2、向父母說一句貼心的話,幫父母做一件家務(wù)活,送給父母一份禮物。(有條件的同學(xué)可以把活動的過程用相機拍下來,或者用DV拍錄下來,統(tǒng)一把相關(guān)資料上交到團(tuán)委。)
3、學(xué)雷鋒,從身邊做起,潔凈校園,舉行一次“從身邊做起,與文明握手”的全校性大掃除活動。
4、校園廣播播放學(xué)雷鋒歌曲,各班組織學(xué)生踴躍提交廣播稿,選出優(yōu)秀的稿件進(jìn)行廣播。
5、組織學(xué)生學(xué)唱學(xué)雷鋒歌曲、革命歌曲。
6、以“學(xué)雷鋒精神,樹集體觀念”為引導(dǎo),組織一次拔河比賽。
(三)“學(xué)雷鋒,做公益”活動
1、組織學(xué)生外出活動??梢钥紤]敬老院,兒童福利院,特殊學(xué)校,看望我校退休有病的教職工,具體活動將從中選定一個。
2、各班推薦好人好事,每班最少要推薦一個人一件事。每位同學(xué)至少做一件好事。(班級推薦的要有圖片資料。)
3、以植樹節(jié)為契機,提倡綠色環(huán)保,督促學(xué)生養(yǎng)成健康文明的生活方式,節(jié)約用電用水,制止亂丟垃圾,杜絕抽煙行為。
第三階段:總結(jié)評比(3月28日~3月31日)
1、開展一期黑板報評比活動(檢查評比時間為3月29日)
板報內(nèi)容及要求:
(1)主題鮮明。
(2)內(nèi)容要切合班里的實際,大力宣傳班中的好人好事,找最有意義、最有代表性的好人好事來做典型。
(3)張貼學(xué)雷鋒的題詞和雷鋒的圖片。
“學(xué)雷鋒做奉獻(xiàn),愛心獻(xiàn)給千萬人”
二、活動內(nèi)容
1、營造學(xué)雷鋒的良好氛圍。從2月底開始,機關(guān)及局屬各單位要在醒目位置懸掛以學(xué)雷鋒、弘揚和培育民族精神為主要內(nèi)容的大幅標(biāo)語;板報、學(xué)習(xí)園地等要組織專題內(nèi)容的宣傳報道,形成一個人人都來關(guān)心、支持和積極參與學(xué)雷鋒活動的良好社會氛圍。
2、圍繞為群眾辦實事這個主題,建立“學(xué)雷鋒小分隊”、志愿者服務(wù)隊,就近結(jié)成扶貧幫困對子,切實為生活需要照顧的孤寡老人、殘疾人家庭解決生活中的實際困難。通過捐資助學(xué)形式,與甘井子區(qū)范圍內(nèi)家庭特別困難、成績優(yōu)異的學(xué)生結(jié)成幫扶對子,將助學(xué)款親自交到學(xué)生的手中,并在生活上、學(xué)習(xí)上給予力所能及的幫助。
3、同本職工作結(jié)合起來,從我做起,從點滴做起,切實把學(xué)雷鋒活動抓出成效。如開展城鄉(xiāng)環(huán)境衛(wèi)生大整治活動,為群眾創(chuàng)造一個優(yōu)美、舒適的生產(chǎn)、生活環(huán)境;開展“送法律進(jìn)社區(qū)”等各種形式的活動。
三、幾點要求